ПЦР (полимеразная цепная реакция) – достижение молекулярной биологии, одна из главных методик клинической лабораторной диагностики конца 20-го и начала 21-го веков, приносящая огромную пользу в различных областях медицинской науки. ПЦР (полимеразная цепная реакция) на гепатит С — определяет причину появления РНК вируса в организме человека. Что такое ПЦР, как работает метод ПЦР в диагностике, преимущества методики, показания, подготовка к проведению ПЦР-анализа, как проводится ПЦР-анализ, что показывают результата теста.
ПЦР диагностика - анализ на инфекции (+ видео)
Как работает ПЦР тест на коронавирус. ПЦР-тестирование (также известное как тестирование полимеразной цепной реакции) — это тип лабораторного исследования, который сообщает, есть ли у кого-то в настоящее время COVID-19. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — высокоточный метод диагностики заболеваний, основанный на копировании ДНК или РНК патогена в пробе. Содержание. У вас положительный результат теста на COVID-19. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярно-генетической диагностики, позволяющий обнаружить в организме человека различные инфекционные заболевания. ПЦР (полимеразная цепная реакция) – достижение молекулярной биологии, одна из главных методик клинической лабораторной диагностики конца 20-го и начала 21-го веков, приносящая огромную пользу в различных областях медицинской науки.
ПЦР-исследования
В результате всего за несколько часов из одного фрагмента можно получить достаточно биологического материала для изучения. После изобретения метода ПЦР были изучены и зафиксированы уникальные нуклеотидные последовательности праймеры длиной 15-30 штук , характерные только для конкретного патогена. Если поместить такие праймеры в пробирку с исследуемым материалом, в котором есть ДНК или РНК «живых» патогенов, начнется реакция репликации — создание большого количества копий, которые можно визуально идентифицировать. И при расчете результатов сотрудники лаборатории могут определить, присутствуют ли в исследуемом образце определенные бактерии и вирусы, поэтому результаты анализа в основном качественные. Метод ПЦР строго специфичен и при правильном выполнении не может дать ложноположительного результата. То есть, если инфекции нет, анализ никогда не покажет, что она есть. Поэтому очень часто ПЦР-анализ проводится дополнительно для подтверждения диагноза, а также для того, чтобы определить патоген и его природу.
Преимущества и недостатки На сегодняшний день ПЦР считается наиболее информативным способом определения возбудителей инфекционных заболеваний. Диагностика с помощью этого метода позволяет найти возбудителя, присутствующего в исследуемых материалах. Это — наиболее точный анализ на половые инфекции, скрытые инфекции и другие заболевания, передающиеся половым путем. Кроме этого, с помощью ПЦР сегодня определяется наличие коронавируса и ряда других инфекционных болезней, которые передаются воздушно-капельным путем. Полимеразная цепная реакция является эффективным диагностическим инструментом, который позволяет врачу не только точно определить тип инфекционного возбудителя в организме пациента, но и выявить количество патогенов. Эта помогает обнаруживать хронические инфекции, например, вирусный гепатит.
Отличие ПЦР-диагностики от других методик лабораторных исследований заключается в следующем: Метод направлен на идентификацию самого возбудителя. Диагностика универсальна и может использоваться для выявления нескольких патогенов. Для точной диагностики достаточно только одного биологического образца пациента. Метод обладает высокой чувствительностью и не сопровождается другими перекрестными реакциями.
Результат теста: как интерпретировать?
Для полимеразной цепной реакции требуются сутки. Однако с учетом загруженности лабораторий сроки ожидания могут увеличиться до двух-трех дней. Результат трактуется однозначно. Отрицательный тест на вирус позволяет допустить его отсутствие в организме. Почему только допустить?
Результат исследования может быть неточным. При получении ложноотрицательного есть вероятность, что: забор материала осуществлялся с нарушениями; анализ был взят на поздней стадии заболевания; вирус не попадал в носоглотку или быстро спустился по дыхательным путям; человек продезинфицировал полость рта антисептиком перед забором материала. Вероятность ложноположительного результата невелика. Такое возможно, если тестирование проводилось в антисанитарных условиях вирус попал в биоматериал после забора. Достоверно ли экспресс-тестирование?
Различают такие виды экспресс-теста: исследование методом иммунохроматографии, использование набора реагентов. В первом случае человеку предлагается сдать кровь в медицинском учреждении. У анализа есть преимущества: низкая цена по сравнению с ПЦР; высокая скорость до получаса ; простота реализации. Однако точность его вызывает сомнения. Экспресс-анализ показывает только присутствие компонентов вируса, а не его самого.
Поэтому все положительные пробы важно перепроверять методом ПЦР. С экспресс-наборами например, Standard Q Covid-19 человек работает сам. Это не аналог иммунохроматографии: кровь здесь не понадобится, достаточно мазка из носоглотки. Что именно нужно делать — написано в инструкции. При контакте биоматериала с реагентом происходит реакция с окрашиванием как с тестом на беременность.
Такое исследование на коронавирус достаточно быстрое до 20 минут , однако не слишком точно. Тест на антитела Антитела к коронавирусу, выявленные в организме, показывают его реакцию на возбудитель. Если он вырабатывает специфические иммуноглобулины, это может означать, что: человек переболел COVID-19 в том числе бессимптомно ; антитела способны бороться с вирусом в случае его повторного проникновения в кровь; человек может быть донором и спасать других зараженных, кто переносит заболевание тяжелее.
Различие тестов на коронавирус По материалам интервью с зав. Станкевич Л. Лабораторией госпиталя Hadassah Medical руководит Любовь Ивановна Станкевич, кандидат медицинских наук, специалист в лабораторной диагностике с более, чем 25-летним опытом работы в России и за рубежом, из них почти 20 лет на руководящих должностях. В условиях пандемии COVID-19 она занимается созданием системы тестирования на коронавирус SARS-Cov-2 — диагностики заболевания, с применением не просто разных, а наилучших, наиболее информативных лабораторных диагностических методов, отвечающих цели исследования. Обнаружение вируса Первый и наиболее проверенный и широко используемый метод — ПЦР-диагностика. Используя молекулы мишеней, мы ищем в исследуемом образце специфические участки вирусного генома — последовательности нуклеотидов, характерные только для вируса SARS-Cov-2. И если такие находятся, запускаем цепную реакцию, многократно воссоздавая этот фрагмент. В итоге из единичного найденного участка генома вируса создаётся в тысячи раз усиленная его концентрация. Со специфическим фрагментом генома вируса с продуктами реакции , связывается флюоресцентная метка — своеобразный маркер, который мы можем определить и измерить, поймав оптико-флюоресцентный сигнал. Существуют различные модификации этого метода, но цель их одна — поиск специфических участков генома вируса, присутствие которых позволяет сделать вывод, что в данном биоматериале вирус есть. Все — и азиатские врачи, и европейцы, и американцы, и мы в России и в Израиле — все работают этим методом. Отрицательный и ложноотрицательный результат Однако, отрицательный результат ПЦР-анализа, к сожалению, не говорит об обратном, не исключает наличие вируса в организме. Мы можем только говорить, что вирус не обнаружен.
Пандемия коронавируса продолжает распространяться по всему миру. Установить наличие заболевания можно при помощи ПЦР-тестирования. На сегодняшний день это наиболее достоверный метод постановки диагноза. Обычно для анализа берут слюну из ротовой полости человека. Тест отличается высокой чувствительностью и определяет наличие вируса даже на ранней стадии заболевания. Тест ИФА на наличие антител позволяет определить наличие специфического материала, формирующегося в результате перенесенного заболевания. Наличие определенного количества антител свидетельствует о том, что человек перенес коронавирус. Чем больше титр антител в крови, тем выше иммунитет человека и устойчивость к действию патогенных вирусов. Тестирование на антитела наиболее важно для медицинских работников, пребывающих в инфекционных отделениях, а также для категорий населения, которые в силу своей профессиональной деятельности проводят много времени в контактах с другими людьми. ПЦР помогает установить наличие вируса в мазке из ротоглотки или носоглотки. ИФА-тест показывает реакцию иммунной системы на вторжение инфекции. Он также, как и ПЦР-тест, показывает наличие вируса, но относится к менее достоверным и точным методам диагностики. Отличие есть также в стоимости тестов.
Диагностика методом ПЦР: современный подход выявления инфекционных и генетических заболеваний
Если человек сдал тест на коронавирус, а результат оказался положительным, то это означает, что он является носителем вируса, в данный момент болеет COVID-19 или уже вылечился, но в его организме сохранились антитела. ПЦР-тест положительный, но симптомов нет. Положительный результат ПЦР указывает на выявление следов инфекции в исследуемой биологической пробе. С большой точностью положительный результат указывает на наличие инфекции в данный момент времени. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – молекулярно-генетический анализ. ПЦР-тест положительный, но симптомов нет. Случаи, когда ПЦР-тест на коронавирус оказывается положительным в течение месяца и даже более, как правило, встречаются в стационарах у пациентов, которые болеют тяжелее.
ПЦР ДИАГНОСТИКА. Что это такое?
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) обладает высокой специфичностью при выявлении РНК SARS-CoV-2. О том, как берутся образцы биологического материала и подготовке к сдаче анализа читайте в нашей статье. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – молекулярно-генетический анализ. Тест на полимеразную цепную реакцию (ПЦР) на COVID-19 – это молекулярный тест, который анализирует ваш образец верхних дыхательных путей в поисках генетического материала SARS-CoV-2.
Диагностика коронавируса COVID-19
| ПЦР-тестирование: как работает метод ПЦР в диагностике | ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это высокоточный метод молекулярно-генетический диагностики. |
| Положительный анализ на инфекцию: ПЦР или ИФА | Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. |
| ПЦР: что это за метод, для чего используется анализ | МРТ Эксперт | Что такое ПЦР-исследование? Полимеразная цепная реакция — основной метод, который Минздрав рекомендует для выявления ковида. У человека берут биологический материал из ротоглотки. |
| Может ли ПЦР-тест на COVID-19 показать положительный результат при простуде | Если человек сдал тест на коронавирус, а результат оказался положительным, то это означает, что он является носителем вируса, в данный момент болеет COVID-19 или уже вылечился, но в его организме сохранились антитела. |
| ПЦР-тест и тест на антитела к коронавирусу: как разобраться в результатах? | Тут, помимо положительного и отрицательного результата, есть еще и сомнительный — это когда человек только заболевает и белок еще не выработался в нужных для определения объемах. |
Результаты ПЦР диагностики
| Анализ ПЦР | ПЦР (полимеразная цепная реакция) – достижение молекулярной биологии, одна из главных методик клинической лабораторной диагностики конца 20-го и начала 21-го веков, приносящая огромную пользу в различных областях медицинской науки. |
| Что такое ПЦР-анализ? | ПЦР, бактериологические посевы. |
| ПЦР-тестирование: как работает метод ПЦР в диагностике | ПЦР — это полимеразная цепная реакция. |
| «Вероятность обнаружить вирус снижается». Когда нужно сдавать ПЦР-тест | ПЦР (метод полимеразной цепной реакции) — экспериментальный метод, использующийся при лабораторной диагностике многих инфекционных заболеваний и позволяющий обнаружить большинство микроорганизмов. |
| ПЦР-диагностика | — Ложноположительный результат — это когда пациент не инфицирован коронавирусом, но лаборатория выдала положительный результат теста на SARS-CoV-2 методом ПЦР. |
Как определить коронавирус или что такое анализ ПЦР?
ПЦР помогает установить наличие вируса в мазке из ротоглотки или носоглотки. ИФА-тест показывает реакцию иммунной системы на вторжение инфекции. Он также, как и ПЦР-тест, показывает наличие вируса, но относится к менее достоверным и точным методам диагностики. Отличие есть также в стоимости тестов. ИФА-тестирование намного доступнее. Показания к проведению ПЦР-диагностики появление у пациента признаков, типичных для коронавирусной инфекции; воспаление легких как возможное осложнение инфекции; работа медицинских работников в отделениях, где лечат больных с коронавирусной инфекцией; деятельность патологоанатомом или работа в судебно-медицинском бюро; в период подготовки к проведению хирургической операции. Эти лица входят в перечень лиц, подлежащих обязательному тестированию. Все желающие, которые не входят в эту группу, могут сделать ПЦР-тест по своему желанию в медицинских центрах и клиниках. ПЦР-тест требуют при въезде в большинство стран как подтверждение отсутствия инфицирования.
Положительный результат ПЦР-тестирования позволяет своевременно выявить заболевание, назначить нужное лечение и добиться изоляции пациента, что сохранит других людей от риска заражения. Ее наносят на тест-полоску для анализа наличия антител. Обнаружение IgM указывает на то, что человек болеет коронавирусом или же переболел им относительно недавно. Наличие IgG свидетельствует о том, что инфицирование произошло давно и иммунитет практически отсутствует.
Что делать, если пришел положительный ПЦР анализ? К сожалению, симптомы некоторых заболеваний не всегда видны, и в организме человека таятся скрытые инфекции. После получения положительного результата ПЦР, не стоит сразу паниковать и волноваться.
Существует вероятность ложно-позитивной реакции ПЦР. В подобной ситуации необходимо повторно выполнить данный анализ. Если при первом диагностировании сдавался ПЦР качественный, то при повторном рекомендуется проходить ПЦР количественный. Выполняйте ПЦР анализы в лаборатории при профильной клинике. Если анализ транспортируется в сетевую лабораторию, велика вероятность накладок. Если диагноз подтвердится, необходимо обратится к профильному специалисту для проведения комплексного лечения.
Если инфекция была пролечена и «убита», то ее следы а точнее фрагменты ДНК все равно будут циркулировать в организме. В этом случае результат ПЦР будет ложноположительным. Однако, если инфекция еще активна и не «убита» антибактериальными и противовирусными средствами, то в организме будут персистировать «живые» патогенные микроорганизмы.
Способ не до конца освоен, потому считается перспективным. Как уже было сказано, с помощью методики можно установить отцовство. Используется отдельная модификация анализа. Подготовка к исследованию Меры зависят от того, какой биоматериал будут брать. Вот некоторые варианты: Моча Изучение урины требуется, когда проводят диагностику мочеполовых инфекций, поражений венерического плана у мужчин и женщин. У первых методика применяется не всегда. Часто ее заменяют забором соскоба из уретры. Перед проведением обследования, накануне запрещена гигиена репродуктивных органов. Анализ сдают в течение суток с момента подозрительного полового акта. Но это не строгое требование, а скорее рекомендация по раннему выявлению патологического процесса. Кровь Также ее отдельные компоненты: сыворотка и пр. Забирают для определения гепатитов разных форм, дифференциальной диагностики патологий печени, выявления герпеса, СПИДа, также при обследовании на предмет генетических аномалий. Особых правил подготовки в этом случае нет. Кровь сдают натощак, это единственное требование к пациенту. Мокрота Отделяемое слизистой оболочки дыхательных путей. Исследуется для диагностики респираторных патологий, пневмонии, бронхита, определения источника процесса. Также в рамках выявления других поражений: будь то легочные формы микоплазмоза или прочие. Специальная подготовка не требуется. Биоптат Биологический материал слизистой оболочки пищевода и желудка. Используется для диагностики причин язвы, гастрита и прочих патологий этой области. Например, таким способом удается надежно обнаружить хеликобактер, который чаще всего и оказывается виновником патологических процессов. Подготовки опять же не нужно. Соскобы со слизистых оболочек Используются особенно часто. В основном, в рамках выявления венерических заболеваний, коронавируса. Но не только. Достаточно временно ограничить гигиену половых органов или полости рта, чтобы не смыть следы патогенной флоры, вирусов. Другие биологические жидкости Будь то ликвор, секрет предстательной железы и прочие. По показаниям. Подготовка будет специфической. Вопрос стоит уточнить у лечащего врача. Основном требование подготовки к анализу ПЦР и его проведению — это забор биоматериала в стерильную посуду. Кроме того, образец не должен контактировать с окружающей средой и руками медицинского персонала. Как показывает практика, больше половины случаев неверного результата обусловлена именно нарушениями технологии получения биоматериала. Потому для ПЦР-анализа используются одноразовые колбы, пробирки, вакуумные системы забора крови, которые обеспечивают полную стерильность условий обследования. В случае, если у врача есть подозрения на неточность анализа, диагностика проводится еще раз.
Что такое анализ крови на ПЦР, и зачем он нужен
В случае сочетания положительного теста с выраженными симптомами коронавируса мучительный кашель, высокая температура, потеря вкуса и обоняния , пациент может нуждаться в госпитализации. В некоторых случаях инфекция, попавшая в организм, вызывает тяжелые осложнения: вирусную пневмонию, сердечную и легочную недостаточность, расстройства в работе печени, почек, головного мозга. В таких ситуациях больной нуждается в постоянном медицинском наблюдении и специальном лечении, которое возможно осуществить только в условиях стационара. В любом случае, если человек получил положительный тест на COVID-19, что предпринимать дальше самостоятельно он не решает. Скрыть результаты тестирования тоже не представляется возможным, так как оно проводится в лабораторных учреждениях, контролируемых Министерством Здравоохранения и Роспотребнадзором. В эти организации сразу же отправляются сведения о новых выявленных больных коронавирусом.
На дом к больному выезжает бригада медицинских работников, которые, после обследования, изучения клинической картины и оценки общего состояния больного определяют дальнейший алгоритм действий. Положительный результат без наличия симптомов Отсутствие симптомов при положительном результате на COVID-19 — распространенная ситуация. Бессимптомное течение означает, что проникнув в организм, инфекцию быстро атаковал иммунитет и легко справился с ней. По сути, вирус находится в организме, но не вызывает заболевания. Такие пациенты являются опасными для окружающих, так как, не подозревая о своем носительстве, быстро и беспрепятственно распространяют вирус среди других людей.
Так что же делать, если тест на коронавирус положительный, но болезнь протекает бессимптомно? Если больной живет не один, другие члены семьи тоже должны оставаться дома, так как они являются потенциальными носителями COVID-19. Регулярно поддерживать связь с врачом, строго выполнять его предписания и рекомендации.
Разбираемся, что такое тест на антиген: сроки, точность, цены, можно ли за границу Автор: Артем Беговский. Фото: Александр Ружечка Близится зима, а с ней и сезон простуд. Но при каждом чихании или недомогании делать ПЦР-тест — дорогое удовольствие. На помощь пришли экспресс-тесты, но корректность их результатов вызывает сомнение. Есть еще вариант — иммуноферментный анализ ИФА , в простонародье — тест на антиген. Делается он так же, как и ПЦР, но быстрее, стоит дешевле, да и за границу в некоторые страны с ним уже пускают.
Что еще за тест на антиген? Для начала попробуем разобраться в том, что такое ИФА, и в сути реакции «антиген — антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом.
В подавляющем большинстве случаев она основана на методе ПЦР — полимеразной цепной реакции. Это самый надежный метод ДНК-диагностики, золотой стандарт определения вирусных инфекций. В среднем исследование занимает 3-4 часа. Но поскольку надо доставить образец в лабораторию, зарегистрировать его и пр. Как правило лаборатории заявляют, что выполнят тест от 8 часов до 2-3 дней. Если некоторые лаборатории заявляют, что «Результат будет сегодня», а другие обещают это только через 3 дня, это связано не с продолжительностью собственно анализа, а с логистикой обработки биоматериала.
Более-менее все они одинаковы по своей чувствительности и специфичности. Хотя самые первые тесты, рекомендованные к применению в феврале, отличались немного пониженной чувствительностью. Кроме того, есть и фактор «врача»: в одном случае у пациента могли взять побольше вируса и его система «увидела», в другом — в пробирку попало меньше вирусных частиц, и ответ был ложно-отрицательным. Он включает несколько этапов. Первый этап -высвобождение нуклеиновой кислоты из вируса занимает минут 30-40 , потом идет этап обратной транскрипции — превращение РНК в ДНК и ПЦР-амплификации 1,5 часа. Каждый набор реагентов, как правило, поставляется в комплекте для анализа 96-ти образцов.
Однако, если инфекция еще активна и не «убита» антибактериальными и противовирусными средствами, то в организме будут персистировать «живые» патогенные микроорганизмы. В этом случае итог полимеразной цепной реакции будет положителен на конкретный вирус или бактерию.
Анализ может идентифицировать как определенный вирус например, вирус герпеса , так и его конкретный штамм например, 8 тип герпесвируса.